MTT法檢測細胞活性的原理是什麼
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MTT法是常用的一種細胞活性檢測方法,其原理是通過將MTT熒光染料作用於細胞內,利用細胞內活性代謝產物還原MTT熒光染料為紫色雜質,通過檢測雜質吸光光譜來判斷細胞的存活率和代謝活力。檢測時,步驟一般包括細胞處理、加入MTT染料、細胞還原MTT熒光染料、溶解細胞、吸光度檢測等。
1、細胞處理:將需要檢測的細胞培養在含有試驗物質的培養基中,或者將不同條件下的細胞分別處理。
2、加入MTT染料:在細胞培養基中加入一定濃度的MTT熒光染料,MTT熒光染料會穿透細胞膜進入細胞內部。
3、細胞還原MTT熒光染料:MTT熒光染料在細胞內被代謝酶還原為紫色的雜質。
4、溶解細胞:加入溶劑將細胞溶解,同時將還原後的紫色雜質溶解在細胞培養基中。
5、吸光度檢測:使用酶標儀檢測細胞溶液的吸光度,MTT染料還原產生的紫色雜質的吸光值與細胞的存活率和代謝活力成正比。通過檢測MTT還原後紫色產物在570-630 nm範圍內的吸光值,計算細胞活性和細胞存活率。
MTT法通過檢測紫色雜質吸光光譜來推斷細胞存活率和代謝活力,是一種便捷、直觀、快速的細胞學檢測方法,建議患者選擇正規的醫療機構進行這項檢測。
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